大鼠直腸平滑肌細胞培養試劑盒說明書

注意事項：
. 接收到大鼠直腸平滑肌細胞培養試劑盒說明書，肉眼觀察細胞培養基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照（建議收到時的培養瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞00X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴格無菌操作，打開細胞培養瓶。
4.將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養基培養細胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA-.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。
6.000rpm，5min離心，重懸細胞。
7.換新的細胞培養瓶，37℃，5%CO2培養。 

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大鼠直腸平滑肌細胞培養試劑盒【Rat Intestine PrimacellTM：Normal Rectal Smooth Muscle Cells】
     大鼠直腸平滑肌細胞培養試劑盒說明書平滑肌收縮是胃腸蠕動中基本的運動方式。腸炎時由于平滑肌特殊肌動蛋白的增加導致了平滑肌層的增厚。平滑肌肌動蛋白可能影響收縮力的產生，這進一步證明了炎癥時的腸平滑肌細胞具有可塑性。利用腸平滑肌細胞的培養，可以幫助了解收縮、增殖和胃腸道結締組織對平滑肌細胞的反應。 雖然直腸組織機械韌性很強，但利用本公司試劑盒中提供的直腸組織分離體系來分離，EDTA/EGTA處理過的薄的直腸組織片能使得直腸組織中成直腸細胞的一些功能特性發生改變，從而將成直腸細胞分離開來。

本試劑盒適用于分離培養新生兒或成年人的成直腸細胞。本體系提供了佳的組織分離條件，分離單個細胞的效率是已出版文獻中所報道的5~6倍。此外，本體系還能保證所分離的細胞在培養基中具有很高的活性。利用的成纖維抑制體系，可以大程度地降低所培養的成直腸原代細胞中成纖維細胞的含量。 大鼠直腸平滑肌細胞培養試劑盒適合于培養人的成直腸組織細胞。本試劑盒包含： （）OptiTDSTM大鼠直腸平滑肌細胞組織解離液（3×ml） （2）大鼠直腸平滑肌細胞組織處理緩沖液（00ml） （3）FibrOutTM大鼠直腸平滑肌細胞成纖維抑制劑（ml（500x）） （4）大鼠直腸平滑肌組織洗液（5x00 ml） （5）大鼠直腸平滑肌細胞生長因子（ml 500x）及血清（5x0ml） （6）大鼠直腸平滑肌細胞基礎培養基（5 x00ml） （7）大鼠直腸平滑肌組織預備液（ x00 ml） （8）大鼠直腸平滑肌細胞培養試劑盒使用說明書?

赭色擲孢酵母 Sporobolomyces salomonicolor

百脈根根瘤菌 Rhizobium loti

P85(小鼠肥大細胞瘤細胞)5×06cells/瓶×2

雙孢蘑菇

(含00mL 酶解緩沖液)0mL

小鼠淋巴管內皮細胞*培養基00mL

植物桿菌 Lactobacillus plantarum

費氏中華根瘤菌 Sinorhizobium fredii

MOLT-4全細胞裂解液00μg

覃狀青霉 Penicillium paxilli

大鼠直腸平滑肌細胞培養試劑盒說明書2-氟甲砜分子式：90.65英文名稱：2- phenyl methyl group：7205-98-3分子量： C7H7ClO2S

雙(五甲環戊二)錳分子式：325.39英文名稱：Double (five methyl cyclopentadienyl manganese)：67506-86-9分子量： C20H30Mn 0*

鄰二甲二丙酯（DPRP）英文名稱：The adjacent benzene two formic acid two (DPRP).分子式：250.29分子量： C4H8O4：3-6-8

5--2-溴-3-氯吡分子式：207.46英文名稱：5- amino -2- -3-：30284-52-5分子量： C5H4BrClN2

4-氯-6-乙氧喹啉分子式：英文名稱：4- -6-, ethyl：03862-63-分子量： CH0ClNO

性紅289英文名稱：Acid red 289分子式：676.73373分子量： C35H29N2NaO7S2：2220-28-9

氟銅分子式：0.54英文名稱：氟銅：7789-9-7分子量： CuF2

2,3-二甲溴分子式：85.06英文名稱：Two - methyl 2,3-：576-23-8分子量： C8H9Br

曲美孕酮英文名稱：QuMei progesterone分子式：342.47分子量： C22H30O3：7453-62-5

炔諾肟酯英文名稱：Acetylene and the分子式：369.5分子量： C23H3NO3：3589-28-7

培養步驟：
大鼠直腸平滑肌細胞培養試劑盒說明書對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細胞|細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數換液方式，棄去半數培養基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按：2到：3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。