大鼠滑膜細胞培養試劑盒說明書

大鼠滑膜細胞培養試劑盒【Rat Bone Joint: PrimacellTM：Normal Synovial Cell】
  大鼠滑膜細胞培養試劑盒說明書大鼠滑膜細胞分離自正常大鼠滑膜組織，滑膜細胞主要功能：（）滑膜細胞產生潤滑液成分，并且與關節腔的吸收和血液/潤滑液交換有關。（2）滑膜細胞增生，表現為不依賴于支持物生長，并且分泌大量的效應分子來促進炎癥和關節損壞。（3）是自身自分泌和旁分泌網絡中效應因子的一部分。 雖然滑膜組織機械韌性很強，但利用本公司試劑盒中提供的滑膜組織分離體系來分離，EDTA/EGTA處理過的薄的滑膜組織片能使得滑膜組織中成滑膜細胞的一些功能特性發生改變，從而將成滑膜細胞分離開來。

本試劑盒適用于分離培養新生兒或成年人的成滑膜細胞。本體系提供了佳的組織分離條件，分離單個細胞的效率是已出版文獻中所報道的5~6倍。此外，本體系還能保證所分離的細胞在培養基中具有很高的活性。利用的成纖維抑制體系，可以大程度地降低所培養的成滑膜原代細胞中成纖維細胞的含量。 大鼠滑膜細胞細胞培養試劑盒適合于培養人的成滑膜組織細胞。本試劑盒包含： （）OptiTDSTM大鼠滑膜細胞細胞組織解離液（3×ml） （2）大鼠滑膜細胞細胞組織處理緩沖液（00ml） （3）FibrOutTM大鼠滑膜細胞細胞成纖維抑制劑（ml（500x）） （4）大鼠滑膜細胞組織洗液（5x00 ml） （5）大鼠滑膜細胞細胞生長因子（ml 500x）及血清（5x0ml） （6）大鼠滑膜細胞細胞基礎培養基（5 x00ml） （7）大鼠滑膜細胞組織預備液（ x00 ml） （8）大鼠滑膜細胞細胞培養試劑盒使用說明書

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注意事項：
. 接收到大鼠滑膜細胞培養試劑盒說明書，肉眼觀察細胞培養基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照（建議收到時的培養瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞00X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴格無菌操作，打開細胞培養瓶。
4.將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養基培養細胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA-.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。
6.000rpm，5min離心，重懸細胞。
7.換新的細胞培養瓶，37℃，5%CO2培養。

培養步驟：
大鼠滑膜細胞培養試劑盒說明書對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細胞|細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數換液方式，棄去半數培養基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按：2到：3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。?

木生條孢牛肝菌 Boletellus emodensis

彈性蛋白酶(含00mL酶解緩沖液)0mL

熱帶假絲酵母 Candida tropicalis

小鼠視網膜色素上皮細胞*培養基00mL

人腎系膜細胞*培養基00mL

葡萄汁酵母 Saccharomyces uvarum

醋酸鈣不動桿菌 Acinetobacter calcoaceticus

TE-3(人食管細胞)5×06cells/瓶×2

V79(倉鼠肺細胞)5×06cells/瓶×2

熱帶假絲酵母 Candida tropicalis

大鼠滑膜細胞培養試劑盒說明書氟啉分子式：37.406英文名稱：Fu Malan：2867-47-9分子量： C2H22FNO4

4,5-二氮芴-9-酮(DAFO)英文名稱：4,5- two -9- (DAFO) n fluorene ketone分子式：82.8分子量： CH6N2O：50890-67-0

百秋里英文名稱：Patchouli alcohol分子式：分子量：：

十三英文名稱：Thirteen acid分子式：24.34分子量： C3H26O2：638-53-9

二芐分子式：208.26英文名稱：Two benzyl hydrazine：588-68-分子量： C4H2N2

丙五氟分子式：208.3英文名稱：Allyl - five：736-60-3分子量： C9H5F5

硝酸錳分子式：25.0英文名稱：Manganese nitrate：20694-39-7分子量： Mn(NO3)2.4H2O

2-甲吡分子式：93.3英文名稱：2- methyl pyridine：09-06-8分子量： C6H7N

2-硝-3-甲吡分子式：38.2英文名稱：2- nitro -3- methyl pyridine：8368-73-5分子量： C6H6N2O2

-氟萘分子式：46.6英文名稱：- f：32-38-0分子量： C0H7F