小鼠關節軟骨細胞培養試劑盒培養

注意事項：
. 接收到小鼠關節軟骨細胞培養試劑盒培養，肉眼觀察細胞培養基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照（建議收到時的培養瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞00X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴格無菌操作，打開細胞培養瓶。
4.將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養基培養細胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA-.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。
6.000rpm，5min離心，重懸細胞。
7.換新的細胞培養瓶，37℃，5%CO2培養。 

公司向您小鼠關節軟骨細胞培養試劑盒培養的詳細說明：了解更多原代細胞培養點擊進

小鼠關節軟骨細胞培養試劑盒【Mouse Bone PrimacellTM：Normal Articular Chondrocytes】
     小鼠關節軟骨細胞培養試劑盒培養小鼠軟骨細胞分離自正常小鼠軟骨組織，軟骨細胞主要功能：（）軟骨是人身體中唯不會發生癌變的組織。（2）骨骼在發育初期大部分是由軟骨構成的。（3）軟骨一般起到承重負荷，減少關節間骨骼摩擦等作用。生物科技提供的小鼠關節軟骨細胞，均來自新鮮組織。細胞的培養采用公司專產品小鼠關節軟骨細胞培養試劑盒(Mouse BonePrimaCell: Normal Articular ChondrocytesCat No.3-4022)來優化目的細胞生長條件，以降低雜細胞（如脂肪細胞、纖維細胞等）的污染，同時保證質量的穩定。在生物技術部標準的操作流程下，小鼠關節軟骨細胞傳5代仍可以保持原代細胞的分化狀態，進而可以用于評估體外藥物模型系統和調節特定基因的遺傳功能。 雖然關節組織機械韌性很強，但利用本公司試劑盒中提供的關節組織分離體系來分離，EDTA/EGTA處理過的薄的關節組織片能使得關節組織中成關節細胞的一些功能特性發生改變，從而將成關節細胞分離開來。

本試劑盒適用于分離培養新生兒或成年人的成關節細胞。本體系提供了佳的組織分離條件，分離單個細胞的效率是已出版文獻中所報道的5~6倍。此外，本體系還能保證所分離的細胞在培養基中具有很高的活性。利用的成纖維抑制體系，可以大程度地降低所培養的成關節原代細胞中成纖維細胞的含量。 小鼠關節軟骨細胞細胞培養試劑盒適合于培養人的成關節組織細胞。本試劑盒包含： （）OptiTDSTM小鼠關節軟骨細胞細胞組織解離液（3×ml） （2）小鼠關節軟骨細胞細胞組織處理緩沖液（00ml） （3）FibrOutTM小鼠關節軟骨細胞細胞成纖維抑制劑（ml（500x）） （4）小鼠關節軟骨細胞組織洗液（5x00 ml） （5）小鼠關節軟骨細胞細胞生長因子（ml 500x）及血清（5x0ml） （6）小鼠關節軟骨細胞細胞基礎培養基（5 x00ml） （7）小鼠關節軟骨細胞組織預備液（ x00 ml） （8）小鼠關節軟骨細胞細胞培養試劑盒使用說明書?

人回盲腸細胞出芽短梗霉=出芽茁霉 Aureobasidium pullulans

蘇云金芽孢桿菌 Bacillus thuringiensisHEC--B(人子宮內膜腺細胞)

淡青鏈霉菌 Streptomyces glaucescens釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae大鼠膀胱上皮細胞*培養基

SK-Hep-(人肝細胞)酸球菌亞種 Lactococcus lactis subsp.lactis

桿菌屬 Lactobacillus sp.哈茨木霉

根瘤菌小鼠骨髓瘤細胞

UM-UC-3(人膀胱移行細胞)MG-63, 人骨肉瘤細胞

熱帶假絲酵母 Candida tropicalis嗜酸桿菌 Lactobacillus acidophilus

接骨木鐮孢豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna

小鼠關節軟骨細胞培養試劑盒培養新苷英文名稱：Andrographis glycoside分子式：分子量：：

2,5-二氯-3-硝甲英文名稱：2,5- two -3-分子式：236.0分子量： C7H3Cl2NO4：88-86-8

5-乙硫四氮唑分子式：30.7英文名稱：5- ethylthio tetrazoline：89797-68-2分子量： C3H6N4S

溴酚紅鈉鹽英文名稱：Bromopyrogallol Red sodium salt分子式：534.5分子量： C9HBr2NaO5S：0285-50-2

6-溴-2-甲-,3-并噻唑分子式：228.英文名稱：6- -2- -,3- benzothiazole methyl bromide：5304-2-2分子量： C8H6BrNS

2,5,6-三溴-3-甲吡分子式：329.8英文名稱：2,5,6- three -3- methyl pyridine：39356-82-0分子量： C6H4Br3N

2-溴-5-(三氟甲氧)硝分子式：286英文名稱：2- -5- (three f) nitrobenzene：95668-2-6分子量： C7H3BrF3NO3

癸二酸二酰分子式：230.3英文名稱：Two sebacic acid hydrazide：25-83-7分子量： C0H22N4O2

2,2',3,3',4,5,6-七氯聯分子式：395.32英文名稱：2,2', 3,3', 4,5,6- seven：6894-6-分子量： C2H3Cl7

剛果紅英文名稱：Congo red分子式：696.66分子量： C32H22N6Na2O6S2：573-58-0

培養步驟：
小鼠關節軟骨細胞培養試劑盒培養對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細胞|細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數換液方式，棄去半數培養基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按：2到：3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。