大鼠表皮角質(zhì)形成細(xì)胞說(shuō)明書

注意事項(xiàng)：
. 接收到大鼠表皮角質(zhì)形成細(xì)胞說(shuō)明書，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞00X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過(guò)的）。
3.嚴(yán)格無(wú)菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無(wú)菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA-.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。
6.000rpm，5min離心，重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。 

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大鼠表皮角質(zhì)形成細(xì)胞【RatSkin:NormalEpidermalKeratinocytes】
    大鼠表皮角質(zhì)形成細(xì)胞說(shuō)明書 產(chǎn)品描述：大鼠表皮角化細(xì)胞主要分布于表皮基底層，在上皮程序性死亡后，細(xì)胞產(chǎn)生角化并移向表皮。體外培養(yǎng)的表皮角化細(xì)胞容易導(dǎo)致終末分化，不能充分增殖。表皮覆蓋皮膚和粘膜表面，作為機(jī)體抵抗外界刺激的*道防御性屏障，具有其他器官不可替代的重要生理功能。角質(zhì)形成細(xì)胞可產(chǎn)生粘附分子和細(xì)胞因子，與天然免疫和體內(nèi)穩(wěn)態(tài)相關(guān)。公司提供的大鼠表皮角質(zhì)形成細(xì)胞，采用法制備而來(lái)。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司產(chǎn)品大鼠表皮角質(zhì)形成細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒(RatSkinPrimaCell™:NormalEpidermalKeratinocytesCatNo.3-7547)來(lái)優(yōu)化目的細(xì)胞生長(zhǎng)條件，以降低雜細(xì)胞（如脂肪細(xì)胞、纖維細(xì)胞等）的污染，同時(shí)保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，大鼠表皮角質(zhì)形成細(xì)胞傳5代仍可以保持原代細(xì)胞的分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
      發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。公司提供的細(xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程，保證細(xì)胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基；2、說(shuō)明書及注意事項(xiàng)；3、公司售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
      保存和應(yīng)用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞，如是新鮮原代細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研，不得用于臨床應(yīng)用。?

豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna中慢生華癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii

人臍靜脈平滑肌細(xì)胞大鼠冠狀動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基

凝結(jié)芽孢桿菌 Bacillus coagulans銅綠假單胞菌 Pseudomonas aeruginosa

HBE(人支氣管上皮樣細(xì)胞)lovo, 人結(jié)腸細(xì)胞

糖化酵母 Saccharomyces diastaticus嗜熱鏈球菌 Streptococcus thermophilus

苜蓿中華根瘤菌刺芹側(cè)耳 Pleurotus eryngii

RN-h, 大鼠海馬趾神經(jīng)元小鼠成纖維細(xì)胞

深紅酵母 Rhodotorula rubra人前脂肪細(xì)胞*培養(yǎng)基

苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti熒光假單胞菌 Pseudomonas fluorescens

人腺細(xì)胞厚垣孢普可尼亞菌 Pochonia chlamydosporia

大鼠表皮角質(zhì)形成細(xì)胞說(shuō)明書3-BOC--4-吡甲醛分子式：222.24英文名稱：3-BOC- amino -4- pyridine formaldehyde：6026-95-0分子量： CH4N2O3

4,6-二羥-5-溴嘧分子式：90.98英文名稱：4,6- two hydroxy -5-：5726-38-2分子量： C4H3BrN2O2

2,6-二異丙萘分子式：22.34英文名稱：2,6- two ISO：2457-8-分子量： C6H20

6-氟-3-(4-)-,2-并異噁唑分子式：220.24英文名稱：6氟- 3 -（4 -）-,2-并異噁唑：8463-77-9分子量： C2H3FN2O

4'-正戊-4-聯(lián)(5-CB)分子式：249.35英文名稱：4'- pentyl cyanobiphenyl (-4- 5-CB)：4087-08-分子量： C8H9N

4-芐-7-硝并氧雜惡二唑(BBD)英文名稱：4- benzyl amino group -7- nitrobenzene and BBD ()分子式：270.24分子量： C3H0N4O3：8378-20-6

,2,4,5-四甲英文名稱：,2,4,5- four toluene分子式：34.22分子量： C0H4：95-93-2

大豆苷英文名稱：Soybean glycosides分子式：46.378分子量：C2H20O9：552-66-9

鈣黃綠素英文名稱：Calcein分子式：622.55分子量： C30H26N2O3：46-5-0

4-氯-2-硝甲酸分子式：20.56英文名稱：4- chloride -2-：6280-88-2分子量： C7H4ClNO4

培養(yǎng)步驟：
大鼠表皮角質(zhì)形成細(xì)胞說(shuō)明書對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞|細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按：2到：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。