小鼠結(jié)腸上皮細(xì)胞說明書

注意事項(xiàng)：
. 接收到小鼠結(jié)腸上皮細(xì)胞說明書，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞00X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA-.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。
6.000rpm，5min離心，重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。 

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小鼠結(jié)腸上皮細(xì)胞【MouseColon:NormalColonMucosaEpithelialCells】
    小鼠結(jié)腸上皮細(xì)胞說明書 產(chǎn)品描述：腸上皮細(xì)胞是機(jī)體內(nèi)外環(huán)境的重要屏障，持續(xù)暴露于大量抗原中，也是機(jī)體面對(duì)病原微生物的*道防線。因此，IECs除有吸收、分泌和轉(zhuǎn)運(yùn)等重要生理功能之外，在粘膜先天性和獲得性免疫防御機(jī)制中也起著重要作用。小腸上皮細(xì)胞作為首先接觸抗原的細(xì)胞，在粘膜免疫反應(yīng)的起始階段發(fā)揮關(guān)鍵作用，它決定粘膜免疫反應(yīng)的發(fā)生、性質(zhì)和強(qiáng)度。公司提供的小鼠結(jié)腸上皮細(xì)胞，均來自新鮮組織。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司產(chǎn)品小鼠結(jié)腸上皮細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒(MouseColonPrimaCell?:NormalColonMucosaEpithelialCellsCatNo.3-455)來優(yōu)化目的細(xì)胞生長(zhǎng)條件，以降低雜細(xì)胞（如脂肪細(xì)胞、纖維細(xì)胞等）的污染，同時(shí)保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，小鼠結(jié)腸上皮細(xì)胞可以保持原代細(xì)胞的分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
      發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。公司提供的細(xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程，保證細(xì)胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基；2、說明書及注意事項(xiàng)；3、公司售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
      保存和應(yīng)用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞，如是新鮮原代細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研，不得用于臨床應(yīng)用。?

大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum中慢生華癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii

大鼠主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞大鼠胎兒真皮成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基

異常漢遜酵母 Hansenula anomala釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

CHO-K(倉鼠卵巢細(xì)胞亞株)Mammalian Protein Extraction Reagent/哺動(dòng)物蛋白抽提試劑

豬霍亂沙門氏菌 Salmonella cholerae-suis嗜熱鏈球菌 Streptococcus thermophilus

鏈霉菌 Streptomyces sp.佛羅里達(dá)側(cè)耳 Pleurotus florida

E.G7-OVA(小鼠T淋巴瘤細(xì)胞)小鼠肺細(xì)胞

泡盛曲霉變種 Aspergillus awamori var.人角膜上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基

抗生鏈霉菌 Streptomyces antibioticus熒光假單胞菌 Pseudomonas fluorescens

X光膠片厚垣孢普可尼亞菌 Pochonia chlamydosporia

小鼠結(jié)腸上皮細(xì)胞說明書羅丹明B英文名稱：Rhodamine B分子式：479.02分子量： C28H3ClN2O3：8-88-9

2--6-氯吡分子式：28.56英文名稱：2- amino -6-：45644-2-分子量： C5H5ClN2

3,3'-二氯聯(lián)胺鹽鹽英文名稱：3,3'- two chlorine benzidine hydrochloride分子式：326.05分子量： C2H2Cl4N2：62-83-9

堿式乙酸鋁分子式：62.08英文名稱：Basic aluminum acetate：42-03-0分子量： Al(OH)C4H6O4； Al(OH)(CH3COO)2

2-乙氧-5-溴吡分子式：202.05英文名稱：2- -5- and：55849-30-4分子量： C7H8BrNO

溴五氟分子式：246.96英文名稱：Bromine five fluorine：344-04-7分子量： C6BrF5

羥丙英文名稱：Theoden分子式：238.24分子量： C0H4N4O3：603-00-9

性黃4英文名稱：Acid yellow 4分子式：449.2437分子量： C6HCl2N4NaO4S：6359-97-3

茜素英文名稱：Alizarin分子式：240.2分子量： C4H8O4：72-48-0

二十一英文名稱：Twenty-one acid分子式：326.56分子量： C2H42O2：2363-7-5

培養(yǎng)步驟：
小鼠結(jié)腸上皮細(xì)胞說明書對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞|細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按：2到：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。