人肺大靜脈內(nèi)皮細胞培養(yǎng)

注意事項：
. 接收到人肺大靜脈內(nèi)皮細胞培養(yǎng)，肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞00X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶。
4.將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA-.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。
6.000rpm，5min離心，重懸細胞。
7.換新的細胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。 

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人肺大靜脈內(nèi)皮細胞【HumanLung:PulmonaryVeinEndothelialCells】
    人肺大靜脈內(nèi)皮細胞培養(yǎng) 產(chǎn)品描述：人肺靜脈內(nèi)皮細胞提取于人肺組織，肺大靜脈內(nèi)皮細胞主要有維持血管內(nèi)外的動態(tài)平衡，合成和分泌細胞因子和介質(zhì)，維持凝血和纖溶的動態(tài)平衡等功能。公司提供的人肺大靜脈內(nèi)皮原代細胞均來自新鮮組織，用于培養(yǎng)人肺大靜脈內(nèi)皮原代細胞的組織采集于地方醫(yī)院，組織的采集根據(jù)公司批準的方案進行。細胞的培養(yǎng)采用公司產(chǎn)品人肺大靜脈內(nèi)皮細胞培養(yǎng)試劑盒(HumanLungPrimaCell™:PulmonaryVeinEndothelialCellsCatNo.3-007)來優(yōu)化目的細胞生長條件，以降低雜細胞（如脂肪細胞、纖維細胞等）的污染，同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標準的操作流程下，人肺大靜脈內(nèi)皮原代細胞可以保持原代細胞的分化狀態(tài)，進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
      發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應的細胞密度。公司提供的細胞有標準的鑒定流程，保證細胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基；2、說明書及注意事項；3、公司售后服務標準。
      保存和應用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞，如是新鮮原代細胞，客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細胞，客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研，不得用于臨床應用。

東京根霉 Rhizopus tonkinensis蘇云金芽孢桿菌 Bacillus thuringiensis

豌豆根瘤菌 Rhizobium leguminosarumRL95-2, 人子宮內(nèi)膜腺細胞系

MDA-MB-453(人腺細胞)鼠李糖桿菌 Lactobacillus rhamnosus

美味絲葚霉 Papulaspora sapidusU4-GFP(小鼠子宮頸細胞)

前列腺小刺青霉 Penicillium spinulosum

奇異變形桿菌 Proteus mirabilis諾卡氏菌 Nocardia sp.

大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum-(00X)

SK-BR-3(人腺細胞)MLF, 小鼠淋巴成纖維細胞

桿菌屬 Lactobacillus sp.異常漢遜酵母異常變種 Hansenula anomala var. anomala

根瘤菌豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna

人肺大靜脈內(nèi)皮細胞培養(yǎng)環(huán)黃芪英文名稱：Ring of Astragalus分子式：490.7分子量： C30H50O5：84605-8-5

黃芪皂苷IV英文名稱：Astragalus saponin IV分子式：784.97分子量： C4H68O4：84687-43-4

α-甲丙英文名稱：Alpha methyl acrylic acid分子式：86.09分子量： C4H6O2：79-4-4

過氧月桂酰（LPO）分子式：398.62英文名稱：Peroxide (LPO)：05-74-8分子量： C24H46O4

甲綠英文名稱：Methyl green分子式：653.24分子量： C27H35BrCl3N3Zn：904440

-Boc-4-分子式：20.27英文名稱：-Boc-4- cyano piperidine：949-52-2分子量： CH8N2O2

3-氟-4-甲吡分子式：.2英文名稱：3- -4- methyl pyridine：399-88-2分子量： C6H6FN

氯銅鉀分子式：39.59英文名稱：Potassium chloride：3877-24-2分子量： CuCl2·2KCl·2H2O

4-(2,4-二氯芐氧)-,3-二甲-5-吡唑甲磺酸鹽分子式：439.3英文名稱：4- (2,4- two) -,3- two methyl -5-：580-68-0分子量： C9H6Cl2N2O4S

3,6-二氯咔唑分子式：236.英文名稱：3,6- two chlorine carbazole：5599-7-3分子量： C2H7Cl2N

培養(yǎng)步驟：
人肺大靜脈內(nèi)皮細胞培養(yǎng)對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細胞|細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按：2到：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。