人成骨細(xì)胞說明書

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人成骨細(xì)胞【Human Bone: Normal Osteoblasts】
     人成骨細(xì)胞說明書 產(chǎn)品描述：成骨細(xì)胞是骨形成的主要功能細(xì)胞，負(fù)責(zé)骨基質(zhì)的合成、分泌和礦化。公司提供的人成骨原代細(xì)胞均來自新鮮組織，用于培養(yǎng)人成骨原代細(xì)胞的組織采集于地方醫(yī)院，組織的采集根據(jù)美國IRB 和 HIPAA批準(zhǔn)的方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司產(chǎn)品人成骨細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒(Human Bone PrimaCell™: Normal Osteoblasts Cat No. 3-000)來優(yōu)化目的細(xì)胞生長條件，以降低雜細(xì)胞（如脂肪細(xì)胞、纖維細(xì)胞等）的污染，同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，人成骨原代細(xì)胞可以保持原代細(xì)胞的分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
      發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。公司提供的細(xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程，保證細(xì)胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基；2、說明書及注意事項；3、公司售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
      保存和應(yīng)用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞，如是新鮮原代細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進(jìn)行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研，不得用于臨床應(yīng)用。
培養(yǎng)步驟：
人成骨細(xì)胞說明書對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞|細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按：2到：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

人肺腺癌細(xì)胞，NCI-H975細(xì)胞  x 0^6 cells/T25培養(yǎng)瓶 細(xì)胞系
人肺腺癌細(xì)胞，SPC-A細(xì)胞  x 0^6 cells/T25培養(yǎng)瓶 細(xì)胞系
人肝癌(HBV) ，Hep G2.2.5細(xì)胞  x 0^6 cells/T25培養(yǎng)瓶 細(xì)胞系
人肝癌細(xì)胞氟耐藥株，Bel/Fu細(xì)胞  x 0^6 cells/T25培養(yǎng)瓶 細(xì)胞系
人肝癌細(xì)胞系，Hep-3B細(xì)胞  x 0^6 cells/T25培養(yǎng)瓶 細(xì)胞系
人肝癌細(xì)胞，Bel-7402細(xì)胞  x 0^6 cells/T25培養(yǎng)瓶 細(xì)胞系
人肝癌細(xì)胞，Bel-7404細(xì)胞  x 0^6 cells/T25培養(yǎng)瓶 細(xì)胞系
人肝癌細(xì)胞，Bel-7405細(xì)胞  x 0^6 cells/T25培養(yǎng)瓶 細(xì)胞系
人肝癌細(xì)胞，Hep G2細(xì)胞  x 0^6 cells/T25培養(yǎng)瓶 細(xì)胞系
人肝癌細(xì)胞，huh-7.5.細(xì)胞  x 0^6 cells/T25培養(yǎng)瓶 細(xì)胞系
人肝癌細(xì)胞，huh-7.5細(xì)胞  x 0^6 cells/T25培養(yǎng)瓶 細(xì)胞系
人肝癌細(xì)胞，huh-7細(xì)胞  x 0^6 cells/T25培養(yǎng)瓶 細(xì)胞系
人肝癌細(xì)胞，MHCC-97L細(xì)胞  x 0^6 cells/T25培養(yǎng)瓶 細(xì)胞系
人肝癌細(xì)胞，SMMC-772細(xì)胞  x 0^6 cells/T25培養(yǎng)瓶 細(xì)胞系
人肝癌細(xì)胞，SNU387細(xì)胞  x 0^6 cells/T25培養(yǎng)瓶 細(xì)胞系
人肝癌細(xì)胞，SNU449細(xì)胞  x 0^6 cells/T25培養(yǎng)瓶 細(xì)胞系
人肝星形細(xì)胞，LX-2細(xì)胞  x 0^6 cells/T25培養(yǎng)瓶 細(xì)胞系
人高轉(zhuǎn)移鼻咽癌細(xì)胞系，5-8F細(xì)胞  x 0^6 cells/T25培養(yǎng)瓶 細(xì)胞系
人高轉(zhuǎn)移肺癌細(xì)胞，95-D細(xì)胞  x 0^6 cells/T25培養(yǎng)瓶 細(xì)胞系
人高轉(zhuǎn)移性肝癌細(xì)胞，MHCC-97H細(xì)胞  x 0^6 cells/T25培養(yǎng)瓶 細(xì)胞系
人細(xì)胞，C33A細(xì)胞  x 0^6 cells/T25培養(yǎng)瓶 細(xì)胞系

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注意事項：
. 接收到人成骨細(xì)胞說明書，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況，并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細(xì)胞00X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA-.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。
6.000rpm，5min離心，重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。