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小鼠糖原合成酶激酶(GSK)酶聯免疫elisa試劑盒規格

小鼠糖原合成酶激酶(GSK)酶聯免疫elisa試劑盒規格

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小鼠糖原合成酶激酶(GSK)酶聯免疫elisa試劑盒規格 詳細資料

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產品名稱:小鼠糖原合成酶激酶(GSK)酶聯免疫elisa試劑盒規格
英文名稱: GSK ELISA Kit規格:96T/48T
存儲條件:2-8℃
有效期:6個月
特異性:本ELISA檢測試劑盒可同時檢測天然或重組的,且與其他相關蛋白無交叉反應。
檢測種屬:人、大小鼠、兔、羊、猴、豬、豚鼠ELISA檢測試劑盒等種屬。
適用范圍:此試劑盒僅用于科研實驗,禁用于臨床 。

小鼠糖原合成酶激酶(GSK)酶聯免疫elisa試劑盒規格類型和操作步驟
ELISA可用于測定抗原,也可用于測定抗體。在這種測定方法中有3種必要的試劑:
①固相的抗原或抗體,
②酶標記的抗原或抗體,
③酶作用的底物。根據試劑的來源和標本的性狀以及檢測的具備條件,可設計出各種不同類型的檢測方法。
(一)雙抗體夾心法、
(二)一步法、
(三)間接法測抗體、
(四)競爭法。
小鼠糖原合成酶激酶(GSK)酶聯免疫elisa試劑盒規格標本要求
.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融。
2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
操作步驟
.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可向客服索取說明書》》 在線索取
2.加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中 先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品0μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同3。
8.洗滌:操作同5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色5分鐘。
0. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
. 測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后5分鐘以內進行。
小鼠糖原合成酶激酶(GSK)酶聯免疫elisa試劑盒規格技術流程:
一、雙抗體夾心法(檢測未知抗原)
、用緩沖液將抗體稀釋至-0ug/ml。在反應孔中加0.ml,4℃ 過夜。次日,棄去孔內溶液,用洗滌緩沖液洗3次。
2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應孔中,置37℃ 孵育小時。然后洗滌(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。
3、加酶標抗體:于各反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃ 孵育0.5~小時,洗滌。
4、加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.ml,37℃ 0~30分鐘。
5、終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則40nm)處,以空白對照孔調零后測各孔OD值,若大于規定的陰性對照OD值的2.倍,即為陽性。
二、間接法(檢測未知抗體)
、用包被緩沖液將已知抗原稀釋至-0ug/ml, 每孔加0.ml,4℃過夜。次日洗滌3次。
2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.05ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育小時,洗滌。(同時做空白、陰性及陽性孔對照)
3、加酶標抗體:于反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標第二抗體(抗抗體)0.05ml,37℃孵育30-60分鐘,洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。
4、加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.ml,37℃ 0~30分鐘。
5、終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則40nm)處,以空白對照孔調零后測各孔OD值,若大于規定的陰性對照OD值的2.倍,即為陽性。

PDE3A    重組人 PDE3A 蛋白 (His & GST 標簽)    Water, nuclease-free
CD68    重組人 CD68 / Macrosialin / Gp0 蛋白 (aa -39, His 標簽)    Water, nuclease-free
CLEC0A    重組人 CLEC0A / MGL / CD30 蛋白 (Fc 標簽)    DEPC-treated Water
CXCL0    重組人 CXCL0 / Crg-2 蛋白    DEPC-treated Water
PDGFRA    重組人 PDGFRa / CD40a 蛋白 (His & GST 標簽)    6X DNA Loading Dye
BPIFA2    重組人 BPIFA2 / C20orf70 蛋白 (Fc 標簽)    6X MassRuler? DNA Loading Dye
MMP9    重組人 RASI- / MMP9 蛋白    6X Orange DNA Loading Dye
PPP3R    重組人 PPP3R 蛋白 (His 標簽)    2X RNA Loading Dye
PPP3CA    重組人 PPP3CA / 蛋白 phosphatase 2B 蛋白 (His 標簽)    X-Gal Solution, ready-to-use
FKBP7    重組人 PPIase / FKBP7 蛋白 (Fc 標簽)    25 mM MgCl2大鼠淋巴細胞分離液 .083    200mL    
8-0230-5    蛋白去除試劑 M    5 g 
3023-00    DNA  Triton    00mL
噻苯隆    25mg    
DNA 電泳分子量標準 (3)φX74 DNA/Hae Ⅲ    50 次    
一管式病毒 DNA-RNAout    50 次    
Turbo 菌種    mL    
30430-500    E.coli DNA 聚合酶 Ι    500U
80202-50    柱式 DNA PAGE 膠回收試劑盒    50 次
小鼠糖原合成酶激酶(GSK)酶聯免疫elisa試劑盒規格梭菌蛋白酶    0μg    
單細胞裂解液 (RNA)    mL    
一站式蛋白質非變性 PAGE 套裝 ( 高 pH)    30 次    
植物 Actin 小鼠單抗    30μL    
20420-2500    核酸外切酶 III    2500U
80205-.5    DMSO,PCR     .5mL
天凈沙非同位素探針雜交試劑盒    5次    
EGY48 酵母感受態細胞    0×00μL    

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