RERF-LC-Ad1人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞

細(xì)胞處理：

1） 凍存細(xì)胞的復(fù)蘇：

將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況和細(xì)胞密度。

2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。

2. 加入0.25％（w / v）-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長(zhǎng)消化時(shí)間），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。

3.輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長(zhǎng)活力，后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。

3）細(xì)胞凍存: 收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時(shí)凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用。

RERF-LC-Ad1人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞

商品屬性

商品介紹

種屬來源：人

性別年齡：見說明

生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

細(xì)胞規(guī)格：1 X 106cells/T25或1 mL凍存管

培養(yǎng)條件：RPMI1640 medium with 10% heat inactivated fetal calf serum37 ℃, 5% CO2

凍存條件：90% FBS + 10% DMSO

傳代方法：1:3傳代, 2-3天傳1代

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：

（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度達(dá)到90%時(shí)，進(jìn)行傳代。

（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。

（3）加入覆蓋瓶底量的且含有EDTA。

（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無超過80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，加入2倍量的中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。

（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。

（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間。

（9）細(xì)胞凍存

細(xì)胞接收后的處理：

1）收到細(xì)胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請(qǐng)拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。

2）請(qǐng)?jiān)?或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)，同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時(shí)收到時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。

3）貼壁細(xì)胞：細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)和貼壁情況，有些貼壁細(xì)胞在快遞運(yùn)送過程中會(huì)因振動(dòng)脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL，放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長(zhǎng)密度達(dá)70%-80%以上，可以對(duì)細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過程中，若因運(yùn)輸振動(dòng)脫落的細(xì)胞需要離心回收。

公司正在出售的產(chǎn)品：

大鼠β2微球蛋白(BMG/β2-MG)檢測(cè)試劑盒 ，英文名： BMG/β2-MG ELISA Kit

Rabbit endostatin (ES) ELISA Kit 兔子內(nèi)皮抑素(ES)檢測(cè)試劑盒

ELISA 小鼠纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(mouse PAP)  進(jìn)口分裝

CLIAKitforIL-1BetaELISAKit大鼠白介素1β

通用型牛病毒性腹瀉病毒(BovineViralDiarrhoeaVirus;BVDV)定性試劑盒20次

ELISAKitBrdU大鼠溴脫氧核苷尿

SMAD2重組小鼠 Smad2 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

干擾素α2(IFNα2)重組蛋白 Recombinant Interferon Alpha 2 (IFNa2)

SCLY重組人 SCLY / Selenocysteine Lyase 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

CA5A Protein Human 重組人 CA5A / CA-VA 蛋白 (His 標(biāo)簽)

FCGR2B Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD32b / FCGR2B 蛋白 (His & AVI 標(biāo)簽), Biotinylated

干擾素α2(IFNα2)重組蛋白 Recombinant Interferon Alpha 2 (IFNa2)

CA5A Protein Human 重組人 CA5A / CA-VA 蛋白 (His 標(biāo)簽)

SMAD2重組小鼠 Smad2 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

FCGR2B Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD32b / FCGR2B 蛋白 (His & AVI 標(biāo)簽), Biotinylated

SCLY重組人 SCLY / Selenocysteine Lyase 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

RERF-LC-Ad1人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞羊促黃體激素(LH)ELISA 試劑盒

Human ai phospholipid aibody (Apl/APA) ELISA Kit 人抗0脂抗體(Apl/APA)檢測(cè)試劑盒

HumanVitaminK1,VK1ELISAKit 人K1(VK1)檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口分裝

CLIAKitforADAMTS13/vWF-cpELISAKit大鼠血管性血友病因子裂解蛋白酶

血液游離酶連續(xù)循環(huán)熒光定量檢測(cè)試劑盒20次

Mousepyruvatedehydrogenase-E1,PDHE1ELISAKit小鼠同酸脫氫酶E1(PDHE1)檢測(cè)試劑盒

乙酰羧化酶測(cè)試盒   可見分光光度法   50管/24樣

淀粉含量測(cè)試盒   可見分光光度法   50管/48樣

α-測(cè)試盒   可見分光光度法   50管/24樣

β-測(cè)試盒   可見分光光度法   50管/24樣