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MET-5A人膜間皮細(xì)胞
| 型 號： | |
| 報 價： | 1 |
MET-5A人膜間皮細(xì)胞正在出售的產(chǎn)品：人腎小球內(nèi)皮細(xì)胞cDNAHRGEC cDNA Hep-2, 人喉癌細(xì)胞系 Human 小鼠黑色素瘤細(xì)胞;B16-F1 Ca Ski(人上皮細(xì)胞) CL-0014A-375(人惡性黑色素瘤細(xì)胞) 小鼠血細(xì)胞;WEHI-3 [WEHI3] 貓腎細(xì)胞;CRFK HA Others
MET-5A人膜間皮細(xì)胞
商品屬性
鑒定 | STR鑒定正確 | 種屬 | 人 |
生長特性 | 貼壁生長 | 細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 |
規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | 分類 | 人細(xì)胞系 |
商品介紹
細(xì)胞別稱：MET-5A；人膜間皮細(xì)胞
種屬來源：人
年齡性別：
組織來源：皮膚
生長特性：貼壁生長
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
背景簡介：
生物安全等級：2
細(xì)胞規(guī)格：1×106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝
支原體檢測：無
基因表達(dá)情況：
保藏機(jī)構(gòu)：
培養(yǎng)基：M199+10%FBS+3.3nM EGF +400 nM hydrocortisone +870nM Insulin
培養(yǎng)條件：氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃
凍存條件：無血清凍存液，液氮儲存
倍增時間：
STR鑒定位點(diǎn)Am
細(xì)胞處理：
1） 凍存細(xì)胞的復(fù)蘇：
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況和細(xì)胞密度。
2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加入0.25％（w / v）-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長消化時間），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。
3.輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長活力，后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。
3）細(xì)胞凍存: 收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用。
細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：
（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長密度達(dá)到90%時，進(jìn)行傳代。
（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。
（3）加入覆蓋瓶底量的且含有EDTA。
（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無超過80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，加入2倍量的中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。
（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。
（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。
（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
（8）根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間。
（9）細(xì)胞凍存
公司正在出售的產(chǎn)品：
紅細(xì)胞生成素受體(EPOR)重組蛋白 Recombinant Erythropoietin Receptor (EPOR)
CDK5 Protein Human 重組人 CDK5 蛋白 (GST 標(biāo)簽)
FLT3重組小鼠 FLT-3 / CD135 / FLK-2 蛋白 Protein
IL17A Protein Canine 重組狗 IL17 / IL17A 蛋白
CRABP1重組人 CRABP1 / RBP5 蛋白 Protein
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小鼠K1(VK1)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat osteocalcin / bone gla protein (OT/BGP) ELISA Kit 大鼠骨鈣素/骨谷蛋白(OT/BGP)檢測試劑盒
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ChickenIerleukin4,IL-4檢測試劑盒雞白介素4(IL-4)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T
載玻片細(xì)胞IKB-ALPHA蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20次
Mouseglucoprotein130,gp130ELISAKit小鼠糖蛋白130(gp130)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T
MET-5A人膜間皮細(xì)胞小鼠細(xì)胞色素氧化酶（CC0）檢測試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠(Cyt-C)檢測試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠細(xì)胞膜表面免疫球蛋白(SmIg)檢測試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠細(xì)胞間粘附分子3(ICAM-3/CD50)檢測試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
兔子高遷移率族蛋白1(HMG-1)ELISA 試劑盒
People androstene two ketone (ASD) ELISA Kit 人雄(ASD)檢測試劑盒
Humanai-macrophageaibodyELISAKit 人抗巨噬細(xì)胞抗體(ai-macrophageAb)檢測試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humanepidemicparotitis,EP檢測試劑盒人流行性腮腺(EP)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T
組織PKG激酶總活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
HumanPancreaticPolypeptide,PPELISAKit人胰多肽(PP)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T
細(xì)胞接收后的處理：
1）收到細(xì)胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請拍照后及時聯(lián)系我們。
2）請?jiān)?或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)，同時給剛收到的細(xì)胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時收到時細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。
3）貼壁細(xì)胞：細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細(xì)胞在快遞運(yùn)送過程中會因振動脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL，放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長密度達(dá)70%-80%以上，可以對細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過程中，若因運(yùn)輸振動脫落的細(xì)胞需要離心回收。
