MDCK狗腎轉化細胞

MDCK狗腎轉化細胞

商品屬性

商品介紹

生長特性 貼壁細胞

細胞形態 上皮細胞樣

凍存條件

凍存液：55% 基礎培養基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養方案A（默認）

生長培養基:

MEM（ATCC改良）＋10% FBS＋1% P/S

培養條件:

氣相：空氣，95%；CO2，5%, 溫度：37℃

推薦傳代比例 1:2-1:4

推薦換液頻率 2-3次/周

參考資料(來源文獻)

參考資料(來源文獻)

細胞處理：

1） 凍存細胞的復蘇：

將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL培養基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，培養基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml培養基的培養瓶（或皿）中37℃培養過夜。第二天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。

2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。

對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法：

1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2. 加入0.25％（w / v）-0.53 mM EDTA于培養瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養箱中消化1-2分鐘（難消化的細胞可以適當延長消化時間），然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養基來終止消化。

3.輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。將細胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的培養基以保持細胞的生長活力，后續傳代根據實際情況按1:2~1:5的比例進行。

3）細胞凍存: 收到細胞后建議在培養前3代時凍存一批細胞種子以備后續實驗使用。

細胞傳代培養操作步驟：

（1）當顯微鏡下細胞形態和生長密度達到90%時，進行傳代。

（2）吸棄培養液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。

（3）加入覆蓋瓶底量的且含有EDTA。

（4）培養瓶放入37℃培養箱進行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細胞有無超過80%的量，發生收縮變圓、細胞間隙變大。輕輕拍打培養瓶使剩余細胞脫落，加入2倍量的中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。

（5）細胞懸液吸至離心管內，1000rpm/min離心3~5min。

（6）吸棄上清，加入培養液重懸細胞，吹打細胞使其均勻分散。

（7）吸棄細胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養瓶中，補充培養液并搖勻，放置37℃的CO2培養箱進行培養。

（8）根據細胞生長狀態確定換液或傳代時間。

（9）細胞凍存

公司正在出售的產品：

小鼠α半乳糖基抗體(Gal)ELISA 試劑盒

Rat aquaporin 2 (AQP-2) ELISA Kit 大鼠水通道蛋白2(AQP-2)檢測試劑盒

Humanprogesteronereceptor,PGRELISAKit 人孕酮受體(PGR)檢測試劑盒 進口分裝

HumanChorionicGonadoophin,HCG檢測試劑盒人絨毛膜(HCG)檢測試劑盒

總微型RNA(miRNA)電泳法分離試劑盒20次

HumanSalmonellatyphiaigen,St-AgELISAKit人傷寒抗原(St-Ag)檢測試劑盒

TFPI重組人 TFPI 蛋白 (His 標簽) Protein

胰淀素(IAPP)重組蛋白 Recombinant Islet Amyloid Polypeptide (IAPP)

HA重組甲型流感 H1N1 (A/Ohio/UR06-0091/2007) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標簽) Protein

ACVRL1 Protein Human 重組人 ALK-1 / ACVRL1 蛋白 (His 標簽)

M. VIRIDIFACIENS NA Protein M.viridifaciens 重組綠色小單孢菌 神經酸酶 (Neuraminidase / NA) (高活性) (His 標簽)

胰淀素(IAPP)重組蛋白 Recombinant Islet Amyloid Polypeptide (IAPP)

ACVRL1 Protein Human 重組人 ALK-1 / ACVRL1 蛋白 (His 標簽)

TFPI重組人 TFPI 蛋白 (His 標簽) Protein

M. VIRIDIFACIENS NA Protein M.viridifaciens 重組綠色小單孢菌 神經酸酶 (Neuraminidase / NA) (高活性) (His 標簽)

HA重組甲型流感 H1N1 (A/Ohio/UR06-0091/2007) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標簽) Protein

MDCK狗腎轉化細胞植物B6(VB6)ELISA 試劑盒

Human ai Toxoplasma IgM aibody (ai-tox IgM) ELISA Kit 人抗弓形體IgM抗體(ai-tox IgM)檢測試劑盒

PorcineFibrinogen,FbgELISAKit 豬血纖蛋白原(Fbg)檢測試劑盒 進口分裝

CLIAKitforAFP甲胎蛋白定性

血液血管緊張素Ⅰ轉化酶1(ACE1)活性比色法定量檢測試劑盒20次

Mousethioredoxieductase,xRELISAKit小鼠硫氧還蛋白還原酶(xR)檢測試劑盒

脂褐質測試盒   Lipfuscin test box

脂蛋白（a）[LP（a）]測試盒   Lipoprotein (a) [LP (a)] test case

游離脂肪酸（NEFA）測試盒   Free fatty acid (NEFA) test case

脂肪酶測試盒   Lipase test kit

細胞接收后的處理：

1）收到細胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h，若發現培養瓶破損、有液溢出及細胞有污染，請拍照后及時聯系我們。

2）請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態，同時給剛收到的細胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養瓶外觀照片一張留存，作為售后時收到時細胞狀態的依據。

3）貼壁細胞：細胞在37℃培養箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下，可去除培養瓶中灌液培養基（若有未貼壁的細胞需要離心回收，重懸打入到原培養瓶中）,加入新配制的培養基6-8mL，放到細胞培養箱中繼續培養。若細胞生長密度達70%-80%以上，可以對細胞進行傳代處理。傳代過程中，若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收。